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非洲猪瘟病毒的活性与灭活

   转载 发布时间:2019-06-12 21:20:00   来源:兽药资讯   举报
【导读】 非洲猪瘟(African SwineFever,ASF)是由非洲猪瘟病毒引起的猪的一种传染病。该病毒除具有一般病毒所具有的常规属性之外,还有其独特的个体特性。自2018 年8 月,我国首次报道非洲猪瘟疫情以来,该病对我国养猪...

非洲猪瘟(African SwineFever,ASF)是由非洲猪瘟病毒引起的猪的一种传染病。该病毒除具有一般病毒所具有的常规属性之外,还有其独特的个体特性。自2018 年8 月,我国首次报道非洲猪瘟疫情以来,该病对我国养猪业造成了严重的打击。针对该病,目前仍然没有特定的治疗措施和有效的疫苗预防,唯一的办法就是加强防控,通过生物安全措施进行预防。然而,防控方案及生物安全措施的制定与实施,必须要依据该病毒的特性确定。为此,搜集相关材料, 以供参考。

1非洲猪瘟病毒简介

非洲猪瘟病毒属于DNA 病毒目(dsDNA), 非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae), 非洲猪瘟病毒属(Asfivirus)。易感动物为猪和钝缘软蜱。非洲猪瘟病毒与虹彩病毒形态相似,但其DNA 结构及复制方式则与痘病毒相似。非洲猪瘟病毒的浮密度在Percoll 中为1.095g/cm3, 在CsCl 中为1.19 ~ 1.24g/cm3,沉降系数(S20w)约为3500S。病毒含有5 种多肽,并含有依赖子DNA 的RNA 多聚糖、蛋白激酶、核酸三磷酸、磷酸水解酶、拓扑异构酶。

2非洲猪瘟病毒的活性

1. 非洲猪瘟病毒的理化特性。非洲猪瘟病毒对腐败、温度、干燥及消毒剂具有较强的抵抗力。在血液、尿和粪中非常稳定,能保留在经加工的猪肉制品中。适宜的蛋白质环境中,非洲猪瘟病毒可在较大的温度范围和pH 范围内存活。

 1)温度。高度耐低温。病毒在冷冻中保存6 年仍有感染性;4℃可存活1 年以上;25 ~ 37℃可存活数周。冻干的病毒在40 ℃ 15d 或50 ℃下3.5h 仍不被破坏。加热: 56℃ /70min 灭活,60℃ /20min 灭活。实验室条件下,-70℃存放非洲猪瘟病毒,能否保持感染性尚不确定,但-20℃存放能被灭活。相对于-20℃,4℃更能够维持病毒的感染活性。

 2)pH。在无血清培养基中pH<3.9或>11.5 可被灭活。血清可增加病毒的抵抗力,例如在pH 为13.4 时,抵抗力在没有血清的情况下可持续21h,在有血清的情况下可持续7d。某些毒株在pH1.9 ~ 13.4 范围内2h 或更长时间内可保持活性。

 3)化学品/ 消毒剂。非洲猪瘟病毒对***、氯仿等脂溶剂敏感,完整的病毒粒子能够抵抗蛋白酶的作用,但易被胰蛋白酶灭活。在0.5% 石碳酸和50% 甘油混合液中,于室温下可保存536d。1% 福尔马林在6d 内或2% 氢氧化钠24h 可杀死血中病毒。灭活:8/1000 氢氧化钠(30min),次氯酸盐-2.3% 氯(30min),3/1000 福尔马林(30min), 3% 邻苯基苯酚(30min)和碘化合物。病毒对环境的抵抗力较强,有效消毒剂的种类较少。目前最有效的消毒剂是10% 的苯及苯酚。

 2. 在猪体内的存活能力。非洲猪瘟病毒感染后,家猪在出现症状前24 ~ 48h 可以承受感染病毒的袭扰。急性感染期,猪的组织、血液、分泌物和排泄物中均含有大量病毒。急性感染后存活猪数月内仍可以向体外排毒,但藏匿病毒的能力下降。野猪只有在淋巴结聚集具有感染水平的病毒量,其他组织一般在感染2 个月后很难聚集有足够感染水平的病毒量。在野猪或家猪的淋巴组织中,具备感染能力的病毒滴度持续期尚不清楚,但不同个体间可能存在差异。

 非洲猪瘟病毒超强毒株可导致猪在12~14d 内100% 死亡,病猪血液中的病毒含量大于108 个病毒粒子/mL, 主要侵袭淋巴细胞,导致淋巴细胞凋亡、血管内皮细胞损伤和出血。中等毒力毒株感染猪死亡率一般为30%~ 50%,低毒力毒株感染仅引起少量猪只死亡,偶见低水平的病毒血症和体温升高,病毒可在感染康复猪体内持续存在。

 3. 在血液中的存活能力。在室温下血中的病毒可存活数周,室温条件下,在血清中非洲猪瘟病毒可存活18 个月,从放在室温下15 周的腐败血清中及放在4℃ 18 个月到6 年的血液中能分离到该病毒。在冷冻的血液中可存活6 年,37℃可在血液中存活1 个月,在腐败的血液中能存活15 周。

4. 在猪场圈舍中的存活能力。暴发非洲猪瘟后全区扑杀的猪场圈舍中3 个月后仍能发现病毒。

5. 在血液和土壤混合物中的存活能力。在23℃及以下温度,病毒在血液和土壤混合物中能存活4 个月。

6. 在冷冻肉或尸体内可以存活15年,在腐败的野猪尸体中至少存活20d。

7. 在粪便中可以存活11d 以上, 20℃在粪便中存活11d。

8. 在腐败的骨髓中可存活数月。在骨髓中存活180d,但不能从腐败的病料样品中分离到非洲猪瘟病毒。

9. 在缺乏蛋白质的环境中,病毒的存活能力大大降低。

10. 病毒可在软蜱组织中存活数年之久。可以在媒介钝缘软蜱(钝缘蜱属,Ornithodoros sp.)中繁殖。

11. 该病毒可在壁虱体内增殖, 并能经卵传递病毒。

12. 对小鼠、豚鼠、仓鼠、马、猫等动物不发生自然感染和人工感染。

13. 在肉制品中的存活能力。非洲猪瘟病毒可在血液、粪便和组织中长期存活,特别是可在已受感染的、未煮熟或煮的不熟的猪肉制品中长期存活。冻肉中可存活数年至数十年,在帕尔玛火腿里存活399d,从加工后贮存5 个月的火腿和贮存了6 个月的火腿的骨髓中发现了非洲猪瘟病毒。

3非洲猪瘟病毒在相关物品中的灭活程序

1. 泔水中非洲猪瘟病毒的灭活程序。根据最新版即2018 年(第27 版)《OIE 陆生动物卫生法典》(简称2018 年《OIE 陆生法典》)中的规定,泔水中非洲猪瘟病毒的灭活应采用以下程序:在连续搅拌的情况下,将泔水保持在至少90℃的温度下至少60min,或在绝对压力为3 巴(bar)的情况下,将泔水保持在至少121℃的温度下至少10min,或用已证明可以使非洲猪瘟病毒灭活的其他等效措施处理。

2. 肉中非洲猪瘟病毒的灭活程序。2018 年《OIE 陆生法典》规定,肉中非洲猪瘟病毒的灭活,应采用以下程序之一:1)热处理。肉中非洲猪瘟病毒的灭活应按下列程序之一进行处理:在密闭的容器中进行热处理,Fo 值大于或等于3.00;在最低温度为70℃的情况下热处理至少30min,应确保整块肉内外都达到该温度。2)干腌猪肉。肉用盐腌制,并干燥至少6 个月。

3. 猪肠衣中非洲猪瘟病毒的灭活程序。猪肠衣中非洲猪瘟病毒的灭活,应采用以下程序:在12℃或更高温度下, 用干盐(NaCl) 或饱和盐水(Aw<0.80) 或含86.5%NaCl、10.7%Na2HPO4和2.8%Na3PO4(重量/ 重量/ 重量)的磷酸盐补充干盐处理至少30d。

4. 猪皮和猪装饰品中非洲猪瘟病毒的灭活程序。皮和装饰品中非洲猪瘟病毒的灭活,应采用以下程序之一:1)在水中煮沸一段适当的时间,以确保去除除骨、獠牙或牙齿以外的任何物质。2)在4%(w/v)的洗涤用苏打(碳酸钠,Na2CO3)溶液中浸泡并搅动,保持pH 值在11.5 或以上,至少48h。3)在保持pH3.0 以下的甲酸溶液(每1000L 水中加100kg 盐和12kg 甲酸)中浸泡搅动至少48h,可添加润湿剂和敷料剂。4)对于生皮(未加工过的),用含2% 洗涤碱(碳酸钠)的盐腌制至少28d。5)用1% 福尔马林处理至少6d。

5. 猪鬃中ASFV 的灭活程序。工业用猪鬃中ASFV的灭活, 应采用以下程序之一:1) 煮沸至少30min。2)在1% 甲醛溶液中浸泡至少24h。

6. 猪用杂物(垫草)和粪便中非洲猪瘟病毒的灭活程序。猪用杂物(垫草)和粪便中非洲猪瘟病毒的灭活,应采用以下程序之一:1)在最低温度55℃下进行至少1h 的湿热处理。2)在最低温度70℃下进行至少30min 的湿热处理。

7. 猪血原料中非洲猪瘟病毒的灭活程序。非洲猪瘟病毒在血液的含量较高,且对外界的抵抗力极强,因此含有非洲猪瘟病毒的血液物品是该病传播的高风险因素。在血液物品的处理、运输、保存过程中必须实施严格的生物安全管理措施。

中华人民共和国农业农村部公告第91 号(农业农村部2018 年12 月28 日),以猪血为原料的饲用血液制品,产品生产应采用喷雾干燥工艺,喷雾干燥设备进风温度不低于220 ℃、出风温度不低于80 ℃,喷雾干燥后的物料要在60℃以上保持20min 以上。成品要在成品库(室温维持20℃以上)存放20d 以上,并实施产品检验合格和非洲猪瘟检测阴性后方可出厂销售。

非洲猪瘟有很高的发病率和死亡率,是引起感染国家和地区重大经济损失的动物疫病之一。面对非洲猪瘟的侵入,我国政府已做出了很大的努力,但是,疫情的威胁仍然很大,我们寄希望于疫苗的尽快研制成功,也更需要重视非洲猪瘟病毒的活性与灭活等基础研究,掌握病毒的自然属性,进一步健全防控措施,彻底查源灭源,从源头上阻止和消灭疫情的蔓延和发生。


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